水中总大肠菌群、粪大肠菌群的快速测定

本方法适用于医院污水、生活污水、垃圾渗滤液，以及其他行业(如餐饮业、食品加
工等)排入地表水中的污水，快速测定总大肠菌群或粪大肠菌群。
1．方法原理
应用灭菌的滤纸吸收选择性培养基，细菌通过滤纸纤维膨胀而被固定并生长繁殖，大
肠菌群在发育时伴随产生琥珀酸脱氢酶将纸片上的TTC(红四碳唑)还原成不可逆的
甲臜(Formazane)产生红色色素，即大肠菌在纸片培养基上呈红色菌落，菌落周围产生
黄圈是大肠菌分解乳糖产酸使指示剂变色的结果。
2．水样采集
用采水器或其他灭菌器采集水样500ml放入灭菌瓶内，如果是经加氯处理的废水，需
加1．5％硫代硫酸钠5ml除去余氯。
3．方法和步骤
每份预监测水样，接种水样总量为55．5ml，分别接种大纸片五张，小纸片10张。每
张大纸片接种10ml水样，五张小纸片每张接种1ml，另五张小纸片接种1：10稀释的水样
lml。接种水样时要均匀涂布于纸片上，用手轻轻压平，作好标记于铺有湿纱布的搪瓷盘
中。测总大肠菌群37℃±l℃培养18～24h观察结果，测粪大肠菌群44．5℃±l℃培养18～
24h，观察结果。
4．判定标准
①纸片上出现紫红色菌落，周围有黄圈者为阳性或出现片状红晕周围为黄地者亦为强
阳性。
②纸片为一种颜色而无菌落生长者为阴性。
③纸片呈紫红色或紫色，菌落周围无黄圈者为阴性。
④酸性水样接种后纸片变黄，经培养无紫红色菌落者为阴性。
⑤纸片变色并呈不典型菌落结果可疑者，应作复发酵进行验证。
5．报告结果
根据阳性纸片张数，查MPN值表(如水样污染较重可采取适当稀释后接种，查表
5-2-10 MPN表后乘以稀释倍数，报出结果)，报出1L水中大肠菌群或粪大肠菌群数。